熒光,是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當某種常溫物質經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。在日常生活中,人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光。
在許多應用領域如材料學、生物學(葉綠素和類胡蘿卜素)、生物醫(yī)學(惡性病的熒光診斷)和環(huán)境應用中都需要用到熒光檢測技術。在熒光測量過程中,由于熒光是一種非常微弱的光,所以通常需要高靈敏度光譜儀,一個高效率的濾光片,將樣本發(fā)出的微弱信號光和高強度的激發(fā)光區(qū)別出來。
激發(fā)光打在被測物質上,被測物質中的分子、原子吸收激發(fā)光的能量后,從低能級躍遷到高能級。該高能級是不穩(wěn)定的,經(jīng)過一段時間后,分子、原子自發(fā)的從非穩(wěn)態(tài)的高能級躍遷到穩(wěn)態(tài)或亞穩(wěn)態(tài)的較低能級,同時發(fā)出一個光子。不同的原子、分子的能級是固定的,因此它們發(fā)出的光子能量是一定的,即波長一定。我們只要測出該熒光的波長,即可以識別所測物質的元素和成份,而比較熒光強度,我們可以測出它的含量.
熒光光譜儀是研究藥物與蛋白質相互作用的常用儀器。藥物與蛋白質相互作用后可能引起藥物自身熒光光譜和蛋白質自身熒光(內(nèi)源熒光)光譜以及同步熒光光譜的變化,如熒光強度和偏振度的改變、新熒光峰的出現(xiàn)等,這些均可以提供藥物與蛋白質結合的信息。