日本最大色倩网站www_日本中文高清国产_日本一区二区三区视频在线观看_日本亚洲一区二区三区_日本熟妇在线观看_日本三级韩国三级欧美三级_国产女同无遮挡互慰高潮视频

聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自化工儀器網(wǎng)

400-875-1717轉(zhuǎn)866

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  【熱門應(yīng)用】WAVE在本屆生物物理大會(huì)掀起GCI技術(shù)“熱浪”

【熱門應(yīng)用】WAVE在本屆生物物理大會(huì)掀起GCI技術(shù)“熱浪”

更新時(shí)間:2022-12-27       點(diǎn)擊次數(shù):1097

基于GCI技術(shù)的分子相互作用動(dòng)力學(xué)分析

在藥物開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用


本文由馬爾文帕納科醫(yī)藥行業(yè)業(yè)務(wù)發(fā)展專家范陽(yáng)晶供稿

2022

圖片



WAVE分子相互作用分析儀亮相

2022年生物物理大會(huì)


在剛剛結(jié)束的2022年生物物理大會(huì)上,由馬爾文帕納科醫(yī)藥行業(yè)業(yè)務(wù)發(fā)展經(jīng)理/分子互作產(chǎn)品線經(jīng)理韓佩韋博士代表公司參與了結(jié)構(gòu)及計(jì)算生物學(xué)方向的分會(huì)報(bào)告,并向與會(huì)者推介了馬爾文帕納科最新推出的基于光柵耦合干涉GCI技術(shù)的分子互作分析儀WAVE,受到了與會(huì)者的廣泛關(guān)注。


此次大會(huì)雖受疫情影響臨時(shí)改為線上會(huì)議,但仍吸引了970余名參會(huì)代表注冊(cè)參會(huì),為期三天的會(huì)議共有201位來(lái)自各大高校、科研專家的精彩報(bào)告,累計(jì)參會(huì)20萬(wàn)人次。


關(guān)注馬爾文帕納科公眾號(hào)獲取分會(huì)場(chǎng)回看鏈接


那么會(huì)議中受人矚目的,具備先進(jìn)的GCI技術(shù)的WAVE分子互作分析儀,究竟能為生物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域帶來(lái)什么樣的支持呢?他和傳統(tǒng)的分子互作技術(shù)相比又有哪些差異和優(yōu)勢(shì)呢?本文將針對(duì)以上問(wèn)題予以解答。


1

關(guān)于光柵耦合干涉技術(shù)(GCI)


光柵耦合干涉技術(shù)(Grating-Coupled Interferometry, GCI)是一種近年發(fā)展起來(lái)的具有高靈敏度的基于芯片的非標(biāo)記生物傳感器技術(shù),它區(qū)別于依賴熒光和免疫等標(biāo)記分子的傳統(tǒng)分子間相互作用技術(shù)。


通過(guò)一次GCI實(shí)驗(yàn),用戶可以快速、準(zhǔn)確、可靠的獲取一整套描述分子間相互作用的信息,包括并不限于結(jié)合有無(wú)、結(jié)合特異性、描述結(jié)合強(qiáng)弱的親和力KD或鍵合常數(shù)KA、描述結(jié)合快慢與穩(wěn)定性的動(dòng)力學(xué)常數(shù)(結(jié)合速率常數(shù)ka與解離速率常數(shù)kd)、樣品活性濃度、分子間結(jié)合機(jī)制以及理論熱力學(xué)信息(范德霍夫焓變)等。GCI技術(shù)的商業(yè)化產(chǎn)品是Creoptix WAVE系列(2022年初被馬爾文帕納科收購(gòu)作為旗下Label-Free分子互作分析平臺(tái)的一員)。


GCI技術(shù)具有高靈敏度、分析物的分子量無(wú)下限以及捕獲快速解離動(dòng)力學(xué)等優(yōu)勢(shì),改進(jìn)了基于片段的小分子篩選和動(dòng)力學(xué)分析,與無(wú)堵塞的流路集成芯片配合使用,加速了藥物開(kāi)發(fā)的過(guò)程。


圖片

圖1 光柵耦合干涉技術(shù)(GCI)示意圖


2

弱相互作用也能得到很好的數(shù)據(jù)


在基于片段的篩選中發(fā)現(xiàn)的弱結(jié)合物通常是根據(jù)親和力而不是動(dòng)力學(xué)進(jìn)行排名的,因?yàn)樗鼈兊慕怆x速率常數(shù)kd非??欤@是傳統(tǒng)的SPR儀器無(wú)法解決的問(wèn)題。然而,由于具有超快速的流路切換時(shí)間,Creoptix WAVE系統(tǒng)可以提供出色的分辨率,在高達(dá)10 s-1的解離速率下仍然能夠可靠地確定動(dòng)力學(xué),提供了一個(gè)多功能的片段藥物篩選和分析平臺(tái)。


使用4PCZ WAVE芯片固定淀粉樣纖維蛋白(Amyloid Fibrils),小分子硫黃素(ThT,319 Da)以4種濃度(50 mM ~ 6.25 mM)注入,擬合后顯示出10 s-1左右的解離速率常數(shù)。

圖片

圖2 淀粉樣纖維蛋白與硫黃素的結(jié)合分析


下圖為在PCP WAVE芯片上捕獲的6-mer寡核苷酸(1.7 kDa)與其互補(bǔ)的ssDNA結(jié)合的傳感圖,擬合后顯示出10 s-1左右的解離速率常數(shù)。


圖片

圖3 寡核苷酸與其互補(bǔ)的ssDNA的結(jié)合分析


3

創(chuàng)新的waveRAPID技術(shù)


加快藥物發(fā)現(xiàn)的早期階段對(duì)于更快地將新藥送到患者手中至關(guān)重要。為了滿足用戶需求,Creoptix推出了測(cè)量動(dòng)力學(xué)的新方法。在傳統(tǒng)的動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)中,分析物以不斷增加的濃度被注入,每次注射的持續(xù)時(shí)間一樣。然而,Creoptix創(chuàng)新的waveRAPID (Repeated Analyte Pulses of Increasing Duration)技術(shù)通過(guò)以不同時(shí)長(zhǎng)注入單一濃度的分析物,不斷增加在芯片表面的脈沖時(shí)間來(lái)進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析,該方法免去了濃度梯度的稀釋步驟,大大減少了人為稀釋誤差和實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備時(shí)間。


圖片

圖4 waveRAPID與傳統(tǒng)動(dòng)力學(xué)的方法比較



用waveRAPID和傳統(tǒng)的多循環(huán)動(dòng)力學(xué)測(cè)量小分子化合物FUR(分析物)與碳酸酐酶CAII(配體)的結(jié)合。使用WAVEcontrol軟件的“Direct Kinetics"分析,兩種方法都能提供高度一致的結(jié)果。


圖片

圖5 waveRAPID與傳統(tǒng)動(dòng)力學(xué)的數(shù)據(jù)比較


使用waveRAPID技術(shù),在18小時(shí)內(nèi)完成了對(duì)90個(gè)小分子的動(dòng)力學(xué)分析,圖中顯示的結(jié)果為篩選過(guò)的具有低統(tǒng)計(jì)學(xué)誤差的速率常數(shù),突出展示了三種不同結(jié)合強(qiáng)度的相互作用的傳感圖和擬合圖。


圖片

圖6 小分子藥物苗頭化合物的waveRAPID動(dòng)力學(xué)篩選


結(jié)論

Conclusion


通過(guò)Creoptix WAVE所提供的親和力和動(dòng)力學(xué)信息能夠表征藥物結(jié)合的詳細(xì)動(dòng)力學(xué)機(jī)制,為開(kāi)發(fā)具有高選擇性的藥物提供了理論基礎(chǔ),使得未來(lái)藥物設(shè)計(jì)中的計(jì)算和實(shí)驗(yàn)更加合理化。提高通量是藥物發(fā)現(xiàn)過(guò)程中經(jīng)常提到的需求,使用waveRAPID技術(shù)大大縮短了總測(cè)量時(shí)間,在藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。



參考文獻(xiàn)

[1] Kartal O, Andres F, Lai MP, et al. waveRAPID-A Robust Assay for High-Throughput Kinetic Screens with the Creoptix WAVEsystem. SLAS Discov. 2021; 26(8): 995-1003.


[2] FitzGerald EA, Butko MT, Boronat P, et al. Discovery of fragments inducing conformational effects in dynamic proteins using a second-harmonic generation biosensor. RSC Adv. 2021; 11(13): 7527-7537.


相關(guān)產(chǎn)品

圖片

WAVE 分子相互作用分析儀


WAVE分子相互作用分析儀擁有基于光柵耦合干涉技術(shù)(GCI)的光學(xué)生物傳感器,且具有創(chuàng)新性的微流控技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在更廣泛的樣品范圍內(nèi)提供更高質(zhì)量的分子結(jié)合親和力數(shù)據(jù)和動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù),幫助藥物和生物科學(xué)研究人員加快新藥發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)的進(jìn)程。與傳統(tǒng)動(dòng)力學(xué)分子互作分析技術(shù)相比具有如下優(yōu)勢(shì):


  • 無(wú)需配置濃度梯度樣品

  • 10倍于傳統(tǒng)分子互作技術(shù)分析速度

  • 超高靈敏度,捕獲快速動(dòng)力學(xué)

  • 微流控技術(shù),不堵塞流路



關(guān)注馬爾文帕納科公眾號(hào)獲取分會(huì)場(chǎng)回看鏈接



东乡族自治县| 莱阳市| 黎川县| 乡城县| 北宁市| 兰考县| 育儿| 饶河县| 和田县| 大同市| 晋中市| 交口县| 永吉县| 丁青县| 彝良县| 武义县| 榆林市| 四会市| 台湾省| 宁波市| 隆林| 南漳县| 邮箱| 长葛市| 松原市| 砀山县| 锦屏县| 海淀区| 云梦县| 万年县| 开封市| 阳山县| 保德县| 石家庄市| 武威市| 积石山| 霍林郭勒市| 盐池县| 化隆| 渝北区| 江门市|